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影片故事取材于南京大屠杀期间日军真实罪证影像。一群生活在南京的百姓躲在吉祥照相馆中避难，为了尽可能的多活一日，他们被迫帮助日军摄影师冲洗底片，却意外冲印出了能证明日军屠城的罪证照片。他们原本只想在大屠杀中保命活下去，面对日军在南京城内的暴行，他们决定让这些底片留存下去……

目前，影片口碑极佳，看过点映的JR纷纷表示后劲太足了，忍不住流泪。

电影《南京照相馆》的原型故事是南京大屠杀期间，照相馆学徒罗瑾和爱国青年吴旋冒死接力守护日军暴行照片，使其成为 “京字第一号证据” 的真实事件。

1938 年 1 月，15 岁的南京华东照相馆学徒罗瑾在冲洗日军军官送来的胶卷时，看到底片上记录着日军砍头、活埋、奸淫等暴行画面，内心激愤难平。他冒着生命危险，偷偷加洗了 30 余张照片，并精选 16 张制作成一本相册。他在相册封面画了两颗鲜红的心脏，右下方一把利刃刺向心脏，滴出鲜血，右上角写了一个大大的 “耻” 字。在日伪统治下，私藏反日物品会被处死，但罗瑾仍将这本相册秘密保存了两年多。

后来，罗瑾考进了位于毗卢寺内的汪伪政府警卫旅直属通讯队，便将相册带到通讯队，藏在厕所的墙洞中。1941 年初，毗卢寺内突查手榴弹事件，罗瑾担心相册暴露，准备转移时发现其不翼而飞，为免遭杀身之祸，他匆忙逃离南京。不久后，这本相册被通讯队员吴旋发现。吴旋同样深知相册的重要性与危险性，他将相册藏在寺内佛像的腹中，时常悄悄去确认是否安全。

培训结束后，吴旋辗转多地谋生，但始终将相册带在身边。1946 年，南京审判战犯军事法庭征集证据，吴旋毅然向南京市临时参议会呈献了这本用生命守护的相册。最终，这本相册成为审判南京大屠杀主犯谷寿夫的 “京字第一号证据”，在揭露日军暴行、伸张正义方面发挥了重要作用。